無外泌體血清制備步驟

更新時間：2021-04-25　點(diǎn)擊量：1343

　　以外泌體為代表的細(xì)胞外囊泡是近幾年研究的熱點(diǎn)，目前的外泌體研究主要通過研究體外培養(yǎng)細(xì)胞來源的外泌體，分析其在體內(nèi)外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細(xì)胞自然分泌的大量Exosomes，而用于Exosome研究的細(xì)胞必須提前更換無外泌體的血清進(jìn)行培養(yǎng)，以減少對后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的污染。

　　目前市面上存在著商業(yè)化的無外泌體血清，然而由于其價格較高等因素，很多研究者選擇自己制備無外泌體血清，而常用的主要是基于超速離心的無外泌體血清分離方法

　　無外泌體血清制備步驟：

　　1. 根據(jù)需要處理的血清體積選擇合適的轉(zhuǎn)子與超離管。

　　2. 在超凈工作臺，將普通血清置于超離管中，配平后，進(jìn)行熱封口。

　　3. 將封口后的超離管放于離心機(jī)轉(zhuǎn)子中，并加入相應(yīng)適配器然后擰緊轉(zhuǎn)頭蓋。

　　4. 設(shè)置離心程序：4℃，120,000 ×g，離心18小時（也有研究者選擇100,000 ×g離心18小時【2】）。

　　5. 離心結(jié)束后，回收上清液，為避免污染，在超凈工作臺操作。

　　6. 收集得到無外泌體血清，并儲存于-20℃中備用。

　　無外泌體血清產(chǎn)品特點(diǎn)：

　　1、專為外泌體研究而設(shè)計；

　　2、無菌采集的健康胎牛血清過濾法去除外泌體；

　　3、胎牛血清內(nèi)源外泌體去除率達(dá)97%；