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PBS緩沖液配制方法

更新時間:2022-03-29 點擊量:1644
   PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價陽離子(注:PBS不是磷酸緩沖液:phosphate buffer solution,PB)。pbs緩沖液應(yīng)高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
  PBS緩沖液由水、氯化鈉、弱酸KH2PO4和共軛堿Na2HPO4配制而成,通常將pH調(diào)至pH7.4。人體的pH值介于7.35至7.45之間,平均值為7.40。此外,PBS緩沖液還模擬了人體滲透壓和離子濃度。由于它對細(xì)胞無毒,因此被廣泛用于洗滌細(xì)胞、組織運輸和稀釋。尤其在動物細(xì)胞培養(yǎng)實驗中,常用于胰酶消化細(xì)胞前的細(xì)胞洗滌,*去除血清。
    PBS緩沖液的作用不僅僅如此,僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是首選。
  當(dāng)然,磷酸緩沖液也不是萬能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比磷酸緩沖液還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。
  配制方法
  含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
  稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),(KCl),吐溫-20 ,加水。
  PBS:Phosphate Buffered Saline
  PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
  磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
  (NaCl):8g,
  KCl)0.2g,
  加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4,zui后定容到1L